纤连蛋白的分段表达及与乙肝表面抗原相互作用研究

• 作者: 丁晓然 张敏丽 杨静 王升启 王国栋 王峰
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 纤连蛋白 乙肝表面抗原 基因表达 纯化 蛋白芯片 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 24-27,38
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|R3
• 字数: 4460字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2007.01.006

摘要

目的:克隆纤连蛋白(fibronectin)各功能区域基因,在大肠杆菌中表达以筛选与HBsAg相互作用的区域.方法:将纤连蛋白分成7个片段,设计引物,利用RT-PCR从HepG2.2.15中扩增出相应的PCR产物,连接到表达载体pGEX4T-1中,用IPTG诱导目的蛋白在E.coli中表达,通过Western印迹分析对表达产物进行鉴定.融合蛋白纯化后制备蛋白芯片,与HBsAg杂交,筛选纤连蛋白中与HBsAg相互作用的区域.结果:经RT-PCR从HepG2.2.15中扩增到各结构域片段的cDNA,序列分析均正确;SDS-PAGE分析表明,各结构域片段的可溶性表达产物均占细菌可溶性蛋白的10%以上;Western印迹分析提示,诱导表达产物可与GST单抗发生特异性反应.经制备蛋白芯片并杂交,发现片段FN1、FN2信号最强.结论:成功地表达了纤连蛋白各片段,蛋白芯片杂交结果显示纤连蛋白可能是通过Ⅱ型肝素结合区及其羰基端(c端)与HBsAg相互作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王升启	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	315	3297	28.0	41.0
2	杨静	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	25	174	8.0	12.0
3	王国栋	西北农林科技大学生命科学学院	123	1962	25.0	40.0
4	张敏丽	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	38	388	12.0	18.0
5	丁晓然	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	7	26	3.0	4.0
6	王峰	西北农林科技大学生命科学学院	4	6	2.0	2.0