活动性肺结核患者α/β TCR基因重排及CDR3谱型分析

• 作者: 张建波 方丹云 方毅敏 朱晓敏 江丽芳 董涛 赖小敏 黄艳
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 活动性肺结核 T细胞受体 基因重排 CDR3 多重PCR
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 实用临床免疫学
• 页码范围: 1136-1139,1143
• 页数: 5页
• 分类号: R521|R392.12
• 字数: 3531字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立多重PCR方法扩增α/β TCR全长序列,分析活动性肺结核患者病变局部T淋巴细胞α/β TCR基因重排特点及CDR3谱型.方法:分离结核患者肺泡灌洗液中的淋巴细胞,提取RNA后用SMART方法逆转录,运用根据现有文献设计的α和β TCR扩增引物,进行多重PCR扩增以获得其全长序列,构建重组质粒并测序,利用DNAstar及网上TCR资源分析序列.结果:3例患者共获得24个α链序列,13个β链序列.α链以AV1S2(54%)、AV12S3(41%)、AV12S2(5%)为主;β链以BV2(38%)、BV29S1(46%)、BV14(3%)、BV4S2(3%)为主.同一病例及不同病例之间CDR3区呈现多样性,但是标本1、标本3各有一条β链的CDR3氨基酸序列相同:SVGTGTLHQETQY;标本2和标本3的各有2条α链CDR3序列相同:AVRDWAGNMLT;标本2的一个α链和标本3的一个α链的CDR3均有:AV…DNN…RLM序列.结论:建立了TCRα和β链全长序列的多重PCR扩增方法.结核患者病变局部克隆性增殖的TCR α和β链谱型呈限制性取用,克隆增生的T淋巴细胞来自不同的亚群,但是相同的CDR3序列对于识别MTB多肽可能具有特异性.