霍乱弧菌肠毒素B亚单位基因在大肠杆菌和双歧杆菌的表达

• 作者: 云雪霞 胡静 陈清
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 霍乱弧菌肠毒素B亚单位 双歧杆菌 大肠杆菌 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 168-171
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2945字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.02.018

摘要

目的 构建霍乱弧菌肠毒素B亚单位(Cholera toxin B subunit,CTB)基因的大肠杆菌表达重组质粒,并观察其在大肠杆菌和双歧杆菌中的表达.方法 从pBI121质粒PCR扩增获得CTB基因片断,克隆到大肠杆菌载体pGEX-4T-1上,构建重组质粒,然后转化大肠杆菌DH5α和双歧杆菌.转化菌经IPTG诱导,然后用SDS-PAGE和Western blot方法鉴定表达的重组蛋白.结果 构建了重组质粒pGEX-4-CTB,CTB基因片段分子量约为376bp;在大肠杆菌中表达出35kD的霍乱弧菌B亚单位融合蛋白,经SDS-PAGE分析,相对分子量与文献相符,表达的蛋白约占细菌总蛋白的10%;在双岐杆菌中也能得到正确表达,表达量较大肠杆菌低,占细菌总蛋白约5%.Western blotting结果确认了该条带为CTB基因的产物.结论 构建的重组质粒pGEX-4T-CTB能够在大肠杆菌及双歧杆菌中获得表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈清	南方医科大学公共卫生与热带医学学院流行病系	238	2007	21.0	32.0
2	胡静	南方医科大学公共卫生与热带医学学院流行病系	34	181	8.0	11.0
3	云雪霞	南方医科大学公共卫生与热带医学学院流行病系	6	110	5.0	6.0