喉癌细胞hTERT启动子介导基因治疗研究

• 作者: 刘诗权 周云峰 周福祥 廖正凯 熊杰 谢丛华 骆志国 鲍洁
• 来源期刊: 中华放射医学与防护杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因治疗 放射耐受 hTERT启动子 喉癌 HRP/IAA
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 109-112
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2974字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2007.02.001

摘要

目的 研究喉癌细胞中端粒酶活性、端粒酶逆转录酶(hTERT)表达和hTERT启动子活性的关系,以及hTERT启动子介导喉癌基因治疗的可行性.方法 将含hTERT启动子的质粒转染不同放射敏感性喉癌细胞(Hep2和Hep2R),通过报告基因评价启动子活性,RT-PCR检测hTERTmRNA表达,PCR-ELISA法检测端粒酶活性.构建质粒phTERTp-HRP,用RT-PCR和酶活性分析评价辣根过氧化物酶(HRP)表达,以克隆形成实验评价phTERTp-HRP/吲哚乙酸(IAA)对克隆形成率和放射敏感性的影响.结果 Hep2R的端粒酶活性、hTERT mRNA表达水平和hTERT启动子活性分别是Hep2的1.37、1.43和1.81倍.hTERT启动子活性与hTERT mRNA表达水平和端粒酶活性之间显著正相关(P＜0.01).转染phTERTp-HRP后,Hep2R细胞中HRP mRNA表达和HRP活性水平分别是Hep2细胞的2.1倍和1.8倍.0.5 mmol/LIAA处理后,SERSF2分别为1.24(Hep2R)和1.20(Hep2),无IAA和有IAA组存活曲线参数α分别为0.020、0.090(Hep2R)和0.042、0.099(Hep2).结论 hTERT启动子可用于不同放射敏感性喉癌细胞的基因治疗.hTERTp-HRP/IAA基因治疗有望用于喉癌细胞的靶向杀伤和放射增敏.