梭子蟹变应原的分离、纯化与鉴定

• 作者: 刘永平 李文 王锡忠 赵绮华 陈丽金
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 梭子蟹 变应原 SDS-PAGE Western blot FPLC
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 256-259
• 页数: 4页
• 分类号: R392.8
• 字数: 3300字
• 语种: 中文

摘要

目的:对梭子蟹(Portunus pelogicus(Linnaeus))变应原进行分离,鉴定其主要及次要变应原,采用蛋白纯化技术获取梭子蟹天然的主要变应原并进行鉴定,为标准化变应原疫苗的研制提供理论依据.方法:取常规方法制备梭子蟹浸出液,经SDS-PAGE分离,测定各组分的相对分子量;同时用26例对蟹过敏的病人血清进行Western blot,鉴定其主要及次要变应原;利用快速制备液相色谱(FPLC)纯化技术(凝胶过滤层析和离子交换层析)获取主要变应原并作鉴定.结果:SDS-PAGE显示梭子蟹有19条可辨蛋白带,分子量在13 000～90 000之间,其中主带有9条,分子量是20 900、24 200、27 100、29 200、33 700、38 900、48 700、74 700、89 100;Western blot结果表明,26例蟹过敏患者血清全部呈阳性反应,浸出液中共有5条致敏条带,其中分子量在74 400、48 700的是主要变应原,阳性反应率均为100%;纯化后获取了74400、48700的主要变应原;经过免疫鉴定证实其具有免疫活性.结论:梭子蟹74 400和48 700的变应原为主要变应原,层析技术可以对分子量为74400和48700的主要变应原成分进行纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵绮华		16	121	6.0	10.0
2	刘永平		11	76	6.0	8.0
3	王锡忠		7	46	4.0	6.0
4	陈丽金		8	69	5.0	8.0
5	李文		12	74	4.0	8.0