基因芯片技术检测3种肠道病原微生物方法的建立

• 作者: 吴忠华 徐琦 李禾 杨宁敏 金大智 高爽
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因芯片 多重PCR 伤寒沙门氏菌 痢疾杆菌 单核细胞增生利斯特菌
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 441-445
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 6467字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.03.023

摘要

目的:建立一种运用多重PCR和基因芯片技术检测和鉴定伤寒沙门氏菌、痢疾杆菌和单核细胞增生利斯特菌的方法.方法:分别选取伤寒沙门氏菌染色体ViaB区域中编码调控Vi抗原表达的基因(vipR)、痢疾杆菌编码侵袭质粒抗原H基因(ipaH)和单核细胞增生利斯特菌溶血素基因(hlyA)设计引物和探针,探针3'端进行氨基修饰,下游引物标记荧光素Cy3.在优化的PCR和杂交反应条件下,进行三重PCR扩增,产物与包括3种致病菌特异性探针的基因芯片杂交.在评价基因芯片的特异性和灵敏度之后,对临床样本进行检测.结果:只有3种目的致病菌的PCR产物在相应探针位置出现特异性信号,其他阴性细菌均无信号出现;3种致病菌的检测灵敏度均可达到103 CFU/mL;检测30例临床样本的结果与常规细菌学培养结果一致.结论:所建立的可同时检测伤寒沙门氏菌、痢疾杆菌和单核细胞增生利斯特菌的基因芯片方法快速、准确,特异性高,重复性好,为3种肠道致病菌的快速检测和鉴定提供了新方法和新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李禾		1	11	1.0	1.0
2	徐琦		1	11	1.0	1.0
3	吴忠华		1	11	1.0	1.0
4	金大智	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	3	67	3.0	3.0
5	杨宁敏		28	129	7.0	10.0
6	高爽		1	11	1.0	1.0