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蛇菰提取物对人PTP1B酶活性的抑制作用
蛇菰提取物对人PTP1B酶活性的抑制作用
作者:
叶菲
吉腾飞
田金英
苏亚伦
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
蛋白酪氨酸磷酸酶1B
多蕊蛇菰
胰岛素
酶活性
摘要:
目的:胰岛素信号传导系统中的蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B)是胰岛素增敏剂的新靶点之一。本文旨在制备人PTPlB蛋白,并观察多蕊蛇菰(Balaophora polyandra Griff.)提取物对PTP1B的抑制作用。方法:采用分子生物学方法,以IPTG诱导基因重组的hGST-PTPlB BL21 E.Coli工程菌过表达人类PTP1B蛋白,经GST亲和层析柱纯化得到hGST-PTPlB蛋白质。以Bio-Rad蛋白分析试剂测定蛋白含量。采用体外酶学方法,以多肽para-NitroPhenyl Phosphate(pNPP)为底物,观察药物对hGST-PTPIB酶活性的影响。多蕊蛇菰全草用石油醚加热回流,再经不同浓度的水、乙醇等溶剂提取,减压浓缩后得蛇菰提取物。结果:经hGST-PTPlB-BL2 1E.Coli工程菌扩增、诱导表达、并经GST亲和层析柱纯化,可得到人类hGST-PTPIB蛋白质,平均得率为9.2土2.7mg/L。将该蛋白质产物用7.5%SDS-PAGE电泳,紫外扫描分析在分子量40KD附近有明显的单一条带,为hGST-PTPIB蛋白质。分离多蕊蛇菰全草共得到61个提取物。其中,在体外对PTPlB酶的抑制率〉50%的有21个提取物。对抑制率〉80%的7个活性部位,进一步分析量效关系,其50%抑制率的浓度(IC50)分别为0.566、0.588、0.596、0.616、0.667、0.970、和1.23ug/ml。结论:诱导基因重组的hGST-PTPP1B-BL21 EColi工程菌可得到hGST-PTPP1B蛋白质,不同提取部位的蛇菰提取物对PTP1B酶有显著的抑制作用。
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篇名
蛇菰提取物对人PTP1B酶活性的抑制作用
来源期刊
中国药理通讯
学科
医学
关键词
蛋白酪氨酸磷酸酶1B
多蕊蛇菰
胰岛素
酶活性
年,卷(期)
2007,(3)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
40
页数
1页
分类号
R977.15
字数
语种
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吉腾飞
中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所
18
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2
叶菲
中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所
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13.0
3
田金英
中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所
12
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4.0
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中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所
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多蕊蛇菰
胰岛素
酶活性
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中国药理通讯
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季刊
ISSN:
CN:
开本:
出版地:
北京海淀区学院路38号北京大学医学部基础
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创刊时间:
语种:
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3866
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