mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞转化为 H/RS样细胞的影响

• 作者: 何滢 刘腾飞 刘芳 李祖国 沈丽佳 蒋会勇 谢卫兵 谢思明 赵彤
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: mCD99L2基因 RNAi慢病毒表达质粒 肿瘤细胞转化 A20细胞 H/RS细胞
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 610-615
• 页数: 6页
• 分类号: R73-3
• 字数: 3324字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2007.06.003

摘要

目的 探究mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞转化为H/RS样细胞的影响.方法 重组SiRNA表达质粒LV-mCD99L2,体外转染内源性mCD99L2表达阳性的A20细胞,筛选出稳定表达LV质粒的细胞株并扩增培养;采用免疫荧光技术和流式细胞仪检测转化前后两组细胞鼠源CD30表达;透射电镜观察转化后细胞超微结构的形态特点;细胞计数方法动态观测培养细胞干扰组A20-LV-mCD99L2和未经干扰组A20细胞的H/RS样细胞(直径≥25 μm)转型率,以人霍奇金淋巴瘤细胞系L428作为对照;采用流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 获得了稳定表达LV质粒的单克隆细胞株A20-LV-mCD99L2;免疫荧光标记显示转化细胞CD30(+);流式细胞仪检测A20-LV-mCD99L2细胞CD30阳性率为54.4%;透射电镜观察转化后细胞核增大,可见单核、双核及多核,核仁明显的H/RS样细胞;干扰组H/RS样细胞的转型率明显高于未经干扰组(P＜0.01).两组处于S期的细胞无明显差异,两组细胞均未见凋亡峰.结论 mCD99L2基因沉默可诱导小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞转化为H/RS样细胞.