小鼠重组釉蛋白基因稳定表达细胞系的建立

• 作者: 冯海兰 刘国庆 娄雅莉 孙樱林 赵铁强
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 牙釉质蛋白质类 基因表达 细胞系 小鼠
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 151-154
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-167X.2008.02.009

摘要

目的:构建小鼠重组釉蛋白基因的真核表达系统,并建立稳定表达该蛋白的细胞系.方法:取初生小鼠牙胚组织,提取 RNA,用 RT-PCR 技术扩增釉蛋白基因片段,经双酶切后克隆至真核表达载体 pcDNA3.1TM/myc-His(-)B 上, 转化大肠杆菌E.coli DH5α, 中提质粒,将该重组表达质粒转染至 HEK 293A 细胞,用 G418 筛选出阳性克隆,并检测釉蛋白的表达水平.结果:通过测序表明,小鼠釉蛋白基因被成功地连接到了真核表达载体上.将该表达系统转染 HEK 293A 细胞后,进行 Western Blot 检测,证明其中有相对分子质量约 32 000 的釉蛋白表达.结论:成功构建了小鼠重组釉蛋白真核表达载体,建立了稳定细胞系,为获得高纯度的釉蛋白,为进一步研究蛋白质功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯海兰	北京大学口腔医学院口腔医院修复科	71	911	19.0	25.0
2	娄雅莉	北京大学口腔医学院口腔医院修复科	1	0	0.0	0.0
3	孙樱林	北京大学口腔医学院口腔医院修复科	3	0	0.0	0.0
4	赵铁强	北京大学心血管研究所基因转移与基因治疗实验室	2	1	1.0	1.0
5	刘国庆	北京大学心血管研究所基因转移与基因治疗实验室	39	229	9.0	13.0