稳定表达牛催乳素基因的小鼠乳腺上皮细胞系的建立

• 作者: 任晓叶 何佳平 张敬之 张斯敏 张金脉 方彧聃 王娟
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: HC11细胞系 催乳素 慢病毒载体 乳腺特异性基因 乳腺生物反应器
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 100-105
• 页数: 6页
• 分类号: Q291
• 字数: 5487字
• 语种: 中文

摘要

在乳腺上皮细胞体外培养时,为了使其状态接近泌乳期,需要在培养基中添加催乳素.由于催乳素价格昂贵,使得乳腺上皮细胞的体外培养成本颇高.建立在体外培养过程中不需要添加催乳素蛋白的乳腺上皮细胞系,能为在细胞水平研究乳腺细胞相关基因提供诸多方便.利用慢病毒载体的整合特性,建立稳定整合了牛催乳素cDNA (bPRL)表达盒的小鼠乳腺上皮细胞系(HC11细胞系).经10代次以上的传代以后,通过定量PCR检测,证明平均每个细胞中含有2.6个外源的bPRL基因,其表达量为HC11细胞中管家基因β-肌动蛋白(β-actin)表达量的14％左右.另外,先前的研究结果表明催乳素能在HC11和泌乳期的小鼠乳腺上皮组织中有效促进山羊β-酪蛋白启动子启动外源基因的表达.之后的实验证实整合了催乳素基因的HC11细胞(bPRL-HC11细胞系)也有此功能.因此,bPRL-HC 11细胞系可以为体外研究乳腺生物反应器提供良好的细胞模型.