siRNA对肝癌细胞中特异性异常表达FGFR3基因的抑制效应研究

• 作者: 李宏为 杨卫平 沈柏用 邱伟华 陈皓
• 来源期刊: 中华肝胆外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,肝细胞 FGFR3 siRNA
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 686-689
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 4446字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-8118.2007.10.013

摘要

目的 设计和筛选有效抑制纤维母细胞生长因子受体3基因(FGFR3)表达的siRNA序列,构建相应表达载体,研究其对肝癌细胞HepG2生物学特性的影响.方法 根据FGFR3序列,设计3条siRNA序列及1条对照序列:以pRNAT-U 6.1/Neo为载体,并以载体中同时构建的绿色荧光蛋白(GFP)基因编码序列为转染效率内参照;采用脂质体法将pRNAT-U 6.1/Neo-siRNA转染肝癌细胞HepG2;以实时荧光定量PCR(Real time PCR)检测FGFR3的mRNA表达变化,Western印迹法检测FGFR3蛋白质表达变化;[3H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法(3H-Tdr)和细胞克隆形成法分析DNA合成变化及细胞生长能力.结果 所设计合成的3条siRNA序列中均能抑制FGFR3的表达,对mRNA表达抑制率约为74.04%～87.25%,在蛋白质水平表达抑制率为19.65%～90.40%.转染siRNA后,HepG2的细胞克隆形成能力和DNA合成能力明显受到抑制.结论 siRNA能够有效抑制肝癌细胞FGFR3的表达,并继而抑制肝癌细胞的DNA合成和生长,能够为肝癌基因表达调控研究提供新的靶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈柏用	上海交通大学医学院附属瑞金医院外科	123	327	8.0	15.0
2	李宏为	上海交通大学医学院附属瑞金医院外科	114	529	11.0	18.0
3	陈皓	上海交通大学医学院附属瑞金医院外科	60	217	7.0	13.0
4	杨卫平	上海交通大学医学院附属瑞金医院外科	59	366	9.0	18.0
5	邱伟华	上海交通大学医学院附属瑞金医院外科	33	81	5.0	7.0