CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶的序列分析与原核表达

• 作者: 廖伟娇 徐韫健 江洁华
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 超广谱β-内酰胺酶 CTX-M-3 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2180-2183
• 页数: 4页
• 分类号: R378.99
• 字数: 4457字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9727.2007.12.002

摘要

目的 对肺炎克雷伯菌所产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行基因克隆和重组表达,探讨其特性.方法 以产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌49号菌总基因组DNA为模板,PCR扩增CTX-M-3,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列,再将CTX-M-3基因克隆到pBV220/DH5α系统进行重组,重组菌经42℃热诱导,SDS-PAGE电泳鉴定酶蛋白的表达. 结果 PCR扩增出大小为876bp的基因片段,与GenBank上同类酶的基因序列同源性为100%.大肠杆菌DH5α转化pBV220/CTX-M-3重组质粒后,ESBLs试验为阳性,药敏试验结果与原菌株相比耐药性下降.此基因能在大肠埃希菌中大量表达,SDS-PAGE电泳显示,蛋白分子质量大约为31KD.结论 成功表达重组的CTX-M-3型酶,为进一步做酶动力学及酶的其他分子生物学特性研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐韫健		55	285	9.0	13.0
2	廖伟娇		98	542	12.0	17.0
3	江洁华		31	267	8.0	15.0