HBV C区基因克隆和PCR条件优化

• 作者: 袁媛 陈思礼
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎 HBV C区基因 克隆 PCR条件优化
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1279-1280,1284
• 页数: 3页
• 分类号: R512.62
• 字数: 2324字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9727.2007.08.001

摘要

目的 建立PCR优化条件和方法,探讨HBV C区基因在乙型肝炎PCR检测中的应用价值,为荧光定量PCR检测HBV摸索条件.方法 将HBV基因组导入DH5α大肠杆菌,SDS碱裂解法小量提取大肠杆菌阳性构建质粒DNA,设计合适引物对HBV C区基因进行PCR扩增,对PCR条件中的退火温度、Mg2+浓度进行了优化,并比较三种不同Taq DNA聚合酶的灵敏度.结果 转化的大肠杆菌质粒DNA最佳退火温度为58℃,最佳Mg2+浓度为1.5mM,同时确定天源公司的Biostar Taq DNA聚合酶灵敏度最高,扩增到10-6.结论 确立了HBV C区PCR的优化条件,将为后期进行荧光定量PCR检测HBV感染奠定基础以及为探索更有效的检测方法提供实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈思礼	中南民族大学生命科学学院	47	170	7.0	11.0
2	袁媛	华中师范大学生命科学学院	26	136	5.0	10.0