摘要:
目的 研究长白与青海八眉"二元杂交"猪种群携带的内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)亚型,为评价从猪到人异种移植的生物安全性提供依据.方法从长白与青海八眉"二元杂交"猪种群中随机采集33头个体外周血,应用PCR和RT-PCR技术分别检测PERV前病毒DNA和mRNA,研究该种群携带PERV 的亚型,并对PCR扩增的灵敏性进行评估.克隆测序该猪种PERV env基因,结果用NCBI中的BLAST软件进行分析.结果所检测的33头个体均带有PERV前病毒DNA,外周血中均有PERV mRNA表达,其中,69.7 %(23/33)个体携带 env-A,env-B 和env-C 三种囊膜蛋白基因,而其余的30.3 %(10/33)个体只带有env-A 和env-B 两种囊膜蛋白基因,env-C 基因缺失.灵敏性分析实验结果表明,PCR扩增PERV 时,DNA模板不能少于15 ng.克隆 env-A,env-B 和env-C基因,结果提交GenBank(GenBank登录号分别为DQ856326、DQ856327、DQ856328).生物信息分析结果表明,该猪种env 基因与GenBank 登录其他猪种序列相比存在差异,其中env-A、env-B基因发生移码突变,蛋白合成提前终止.结论长白与青海八眉"二元杂交"猪种群携带PERV,69.7 %个体为PERV-ABC 亚型;缺失突变使PERV env-A,env-B 基因阅读框发生改变,有可能影响其感染特性,从生物安全性方面综合考虑,该猪种不宜作为异种移植供体.