传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CG GX基因的克隆与序列分析

• 作者: 崔保安 方剑玉 李新生 杨明凡 赵丽 陈红英
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性喉气管炎病毒 GX基因 聚合酶链反应 序列分析
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 页码范围: 29-32
• 页数: 4页
• 分类号: S432.4+1
• 字数: 2658字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中收录的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)GX基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,应用PCR技术扩增ILTV河南株(ILTV-CG)GX基因.将ILTV-CG接种10日龄鸡胚,提取ILTV基因组DNA进行PCR扩增.将回收的PCR产物与pGEM-T Easy载体进行连接,转化JM109感受态细胞,经蓝白斑筛选,对菌液PCR和酶切鉴定为阳性的菌株进行测序.测序结果表明,所克隆的GX基因全长为950 bp,含有一个开放阅读框,编码299个氨基酸的多肽.推导的氨基酸有4个潜在的N-糖基化位点,有11个与二硫键形成有关的半胱氨酸.序列分析表明,克隆的ILTV-CG GX基因与GenBank中发表的ILTV-SA2株GX基因核苷酸同源性为97.2%,变异点为第124位插入1个碱基G,第136位又插入2个碱基C,从而引起该毒株GX基因推导的氨基酸序列在第33位插人1个亮氨酸,还存在多处氨基酸发生变化,氨基酸同源性为95.3%.GX基因的成功克隆为构建ILTV GX基因缺失的病毒活载体奠定基础.