人细胞周期蛋白cyclin D1基因RNAi表达载体的构建与鉴定

• 作者: 于冬梅 李颖 罗赛 郝立君 郭小英
• 来源期刊: 中国肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: RNAi siRNA cyclin D1 载体构建
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1008-1011
• 页数: 4页
• 分类号: R73-36
• 字数: 3051字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0242.2007.12.014

摘要

[目的]构建针对人细胞周期蛋白cyclin D1基因的RNAi真核表达载体,检测其对人卵巢癌HO-8910细胞cyclinD1基因表达的干扰效率.[方法]以cyclin D1为靶向设计,合成的4条互补寡核苷酸链克隆至pSUPER载体中,得到重组质粒pSUPER-C1～4,行双酶切分析后测序鉴定;运用脂质体介导转染HO-8910细胞,G418筛选;采用RT-PCR检测对cyclin D1基因mRNA表达的干扰,并筛选有效的siRNA干扰序列.[结果]经酶切测序鉴定证实,重组质粒中已插入目的序列;RT-PCR表明有4个重组载体均不同程度抑制目的基因的转录,但以pSUPER-C2的干扰效率最强.[结论]在卵巢癌细胞系筛选出有效干扰cyclin D1基因表达siRNA序列,成功构建针对cyclin D1基因的RNAi真核表达载体有效抑制目的基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李颖		160	1098	17.0	24.0
2	郝立君		74	369	11.0	14.0
3	于冬梅		25	202	8.0	13.0
4	罗赛		33	117	6.0	8.0
5	郭小英		1	5	1.0	1.0