转JAK2基因脐血CD34+细胞体外扩增与生物学特性研究

• 作者: 常乃柏 裴蕾 许晓东 赵声明 顾惜春
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 酪氨酸激酶JAK2 基因疗法 CD34+细胞 扩增
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2460-2464
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 3953字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.12.039

摘要

目的:探讨转基因JAK2介导的脐血干祖细胞长期扩增调控的可行性和转基因细胞的生物学特征.方法:构建逆转录病毒载体MGI-F2JAK2,内含有JAK2基因的功能催化区和2个与小分子靶向基因合成药物(AP20187)结合的位点蛋白(F36v,F2).应用MiniMACS磁珠分选系统纯化分离脐血CD 34+细胞,用含JAK2的逆转录病毒上清转染脐血CD 34+细胞.转染后的CD 34+细胞在IMDM培养体系中,将细胞分为AP20187组;FL组;TPO组;AP20187+FL+TPO(AFT)组.对扩增后的细胞定期检测基因转移后GFP动态变化、细胞免疫标记、造血祖细胞集落培养、染色体核型分析和裸鼠致瘤实验.结果:分选的CD 34+细胞纯度＞91%,基因转移率为的.32%:±6.21%;只有AP20187+FL+TPO组可以使转基因的脐血CD 34+细胞大量增殖,扩增至第8周时细胞数达109,CD34+细胞GFP的阳性率由基线水平逐渐上升并于第8周时达到90%以上;细胞表型为CD33+、CD61+、Gly-A+部分阳性CD38+、HLA-DR+强阳性;CD2、CD7、CD19接近阴性.扩增的CD34+细胞可分别形成BFU-E、CFU-GM、CFU-Mix并以CFU-GM集落为主.扩增后CD34+细胞检测染色体核型正常,裸鼠实验无致瘤特性.结论:转染JAK2基因的人脐血CD34+细胞协同FL和TPO细胞因子可以体外长期扩增脐血干祖细胞,对今后研究细胞信号转导、造血调控以及开展干细胞和基因治疗都有潜在的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	常乃柏	卫生部北京医院血液科	55	293	9.0	14.0
2	顾惜春	卫生部北京医院血液科	26	102	5.0	9.0
3	裴蕾	卫生部北京医院血液科	22	152	7.0	11.0
4	许晓东	卫生部北京医院血液科	20	88	6.0	8.0
5	赵声明	卫生部北京医院血液科	9	32	3.0	5.0