乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白1的克隆及原核表达

• 作者: 成军 李越 林原 洪源 王琦
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎e抗原,乙型 结合蛋白 原核细胞
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1154-1156
• 页数: 3页
• 分类号: R512.62
• 字数: 2974字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.11.018

摘要

目的 对应用酵母双杂交技术及生物信息学技术筛选得到的乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白1(HBEBP1)进行克隆,并诱导其在大肠埃希菌BL21中的表达.方法 应用反转录PCR(RT-PCR)技术,以HepG2细胞mRNA为模板,扩增获得HBEBP1基因片段,连接到pGEM-T载体,双酶切鉴定及测序正确后克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达以获得HBEBP1融合蛋白,并通过SDS-PAGE及Western blot证实融合蛋白的特异性.结果 RT-PCR扩增获得大小为372bp的HBEBP1基因片段,插入至原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导后,成功获得大小约为33kD的重组蛋白,Western blot证实其具有良好的特异性.结论 构建了pET-32a(+)-HBEBP1原核表达载体,并在大肠埃希菌BL21中诱导表达了HBEBP1融合蛋白,为研究HBEBP1蛋白的免疫原性和生物学特性奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林原	大连医科大学药理学教研室	60	445	11.0	18.0
2	成军	北京地坛医院传染病研究所	210	843	13.0	20.0
3	洪源	北京地坛医院传染病研究所	44	70	5.0	6.0
4	李越	北京地坛医院传染病研究所	7	8	2.0	2.0
5	王琦	北京地坛医院传染病研究所	29	36	3.0	4.0