PCR快速检测腹泻患者粪中痢疾杆菌致病基因ipaH和ial

• 作者: 李威 李小丽 栗绍刚 温艳 阴赪宏 黄敏君 齐志群
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 痢疾杆菌 粪便 聚合酶链反应 ipaH基因 ial基因
• 年，卷（期）: 2007,（19）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 2128-2132
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 5421字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.19.010

摘要

目的: 建立一种快速、特异、敏感的分子生物学诊断方法对腹泻患者粪中痢疾杆菌致病基因ipaH及ial进行检测.方法:分别应用常规培养生化血清学鉴定方法、普通PCR、巢氏PCR(nested-PCR)方法, 对71例腹泻患者粪标本进行检测. 痢疾杆菌致病基因ipaH及ial的扩增产物经电泳分离.结果: 在71例腹泻患者粪标本中, 常规培养生化血清学鉴定方法分离出福氏痢疾杆菌24例, 宋内痢疾杆菌23例, 志贺痢疾杆菌1例, 沙门菌23例. 采用普通PCR法检测痢疾杆菌粪标本48例, ipaH基因均阳性(100%);ial基因阳性34例(70.8%), 余14例为阴性. 对该14例粪标本进而采用巢氏PCR法进行ial基因扩增, 其中12份标本阳性. 48例痢疾杆菌粪标本中46例ipaH和ial基因为双阳性(46/48). 沙门菌粪标本23例中ipaH及ial基因表达均为阴性. 以上两种方法的诊断一致性检验Kappa = 0.937, 差异有统计学意义(P<0.05). 71例腹泻患者粪标本采用PCR和巢氏PCR法扩增得到的ipaH和ial基因特异片段与基因库中发表的标准菌株序列比较, 一致性为100%.结论:建立了快速诊断腹泻患者粪中痢疾杆菌致病基因ipaH和ial的PCR检测方法, 具有简便、快速、特异和敏感的特点.