水产品中4种食源性致病菌多重PCR检测方法的建立

• 作者: 兰柳春 吴祥庆 童桂香 谢宗升 韦信贤 黄光华 黄国秋 黎小正
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 水产品 沙门氏菌 大肠杆菌O157∶H7 志贺氏菌 金黄色葡萄球菌 多重PCR
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 2217-2222
• 页数: 6页
• 分类号: S917.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2015.12.2217

摘要

[目的]建立能同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR,为水产品质量安全检测工作提供技术支持.[方法]以LB肉汤培养基为共增菌培养基,根据沙门氏菌invA基因、大肠杆菌O157∶H7 rrbE基因、志贺氏菌ipaH基因和金黄色葡萄球菌femA基因的保守序列设计引物,对引物浓度配比、退火温度及反应体系等进行优化,并对建立的多重PCR进行特异性、敏感性及临床样品检验试验.[结果]4种目标致病菌在LB肉汤培养基中36℃培养18h后,均表现出良好的生长趋势,增菌数量级均在108 CFU/mL以上.优化后的多重PCR能对4种目标菌的单一或混合基因组DNA进行特异性扩增,而对单增李斯特氏菌、肺炎克雷伯菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌等其他菌株的基因组DNA均未扩增出任何条带;对沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7和金黄色葡萄球菌的最低检出限为102 CFU/mL,对志贺氏菌最低检出限为10 CFU/mL.应用该多重PCR对56份水产品进行检测,其结果与按照GB/T 4789-2003、GB/T 4789-2010检测的结果一致.[结论]针对同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR具有快速、便捷、灵敏、准确等优点,可为水产品食源性致病菌检测及其安全控制行业提供一种快速、准确、高效、经济的检测手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦信贤		28	151	7.0	11.0
2	黄光华		44	172	7.0	11.0
3	黎小正		52	274	10.0	13.0
4	吴祥庆		44	201	9.0	11.0
5	兰柳春		20	77	6.0	7.0
6	童桂香		25	116	6.0	9.0
7	黄国秋		17	69	5.0	7.0
8	谢宗升		10	32	4.0	5.0