人硫酸酯酶1转染对胰腺癌细胞膜结构及对细胞生物学行为的影响

• 作者: 张亚男 李俊生 汤文浩 陈卫东
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺肿瘤 硫酸酯酶1 生长因子
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 697-699
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 3266字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2007.06.020

摘要

目的 检测人硫酸酯酶1在胰腺癌细胞株中的表达水平,及转染后对胰腺癌细胞膜的结构及生长增殖能力的影响.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测7株胰腺株硫酸酯酶1 mRNA的表达水平.采用脂质体Lipofectamine方法对Panc-1细胞进行硫酸酯酶1基因转染.Western blot检测转染前后Panc-1细胞硫酸酯酶1蛋白表达.共聚焦显微镜检测细胞膜表面硫酸肝素蛋白多糖(HSPG)结构的变化,应用噻唑蓝(MTT)比色分析法测定胰腺癌细胞的生长增殖能力,并检测转染前后的胰腺癌细胞对3种化疗药物(5-氟尿嘧啶、吉西他滨及放线菌素D)敏感性的影响.结果 7株人胰腺癌细胞株中3株硫酸酯酶1 mRNA呈高表达,其余4株低表达或无表达.硫酸酯酶1稳定转染后,Panc-1细胞稳定表达硫酸酯酶1蛋白成分.转染后细胞膜表面HSPG结构明显改变,并且硫酸酯酶1表达细胞增殖速度减慢,转染组细胞倍增时间为(68.2±4.3)h,明显慢于对照组(50.3±3.2)h,P＜0.05.转染后的胰腺癌细胞对化疗药物的敏感性并无明显改变.结论 人硫酸酯酶1的表达通过影响细胞膜表面HSPG的结构,影响胰腺癌细胞的生长增殖能力,可能作为胰腺癌基因治疗的靶点.