趋化性细胞因子受体CXCR4基因沉默对大肠癌细胞体外侵袭及增殖能力的影响

• 作者: 冷彦 张孟贤 韩娜
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CXCR4基因 短干扰RNA 结直肠癌 侵袭 逆转录-聚合酶链反应 免疫印迹技术 Boyden小室模型 流式细胞术 MTT法
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1331-1337
• 页数: 7页
• 分类号: R73
• 字数: 7427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.12.003

摘要

目的:研究趋化性细胞因子受体CXCR4短干扰RNA(siRNA)对大肠癌细胞系体外侵袭及增殖能力的影响.方法:利用T7 RNA聚合酶体外合成以CXCR4为靶基因的siRNA,用脂质体转染大肠癌SW480细胞,同时设立空白对照组和无关对照组.于转染后48 h采用RT-PCR方法检测CXCR4 mRNA水平,免疫印迹方法检测CXCR4和MT1-MMP的蛋白质水平,Bovden小室模型检测体外侵袭能力的变化,流式细胞术检测细胞周期的分布情况,MTT法测定细胞增殖状况.结果:SW480细胞转染CXCR4 siRNA 48 h后,与空白对照和无关对照相比,CXCR4mRNA水平明显下调(51.53%±6.1% vs 78.4%±3.3%,P＜0.01;51.53%±6.1% vs 87.4%±5.3%,P＜0.01),CXCR4的蛋白质水平明显降低(47.3%±3.7% vs 107.2%±3.6%,P＜0.01;47.3%±3.7% vs 114.7%±4.8%,P＜0.01),MT1-MMP蛋白表达水平也明显下降(43.8%±2.5% vs 64.4%±4.4%,P＜0.01;43.8%±2.5% vs 67.0%±2.9%,P＜0.01),细胞的体外侵袭能力减弱(26.5%±6.1% vs 73.7%±3.4%,P＜0.01;26.5%±6.1% vs 64.5%±5.7%,P＜0.01),细胞周期的分布无明显差异.在无SDF-1存在的情况下,各组细胞的增殖无明显改变;经SDF-1刺激后,各组细胞增殖增加,但CXCR4 siRNA转染组细胞的增殖显著低于空白对照组和无关对照组(24 h:0.55±0.03 vs 0.68±0.06,0.71±0.04,P＜0.05;48 h:0.67±0.04 vs 0.89±0.03,0.94±0.07,P＜0.05;72 h:0.72±0.06 vs 1.36±0.08,1.53±0.07,P＜0.01).以上各指标在空白对照和无关对照之间无显著性差异(P＞0.05).结论:以CXCR4为靶向的siRNA能够有效下调CXCR4基因,降低SDF-1诱导的大肠癌细胞系体外侵袭能力及增殖活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张孟贤	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤科	37	274	7.0	16.0
2	冷彦	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤科	16	87	5.0	8.0
3	韩娜	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤科	25	231	6.0	15.0