干扰素α-2b对人类早幼粒白血病细胞株HL-60细胞的抑制增殖与促进凋亡的作用

• 作者: 于宏 仲任 卢愿 孙立荣 宋爱琴 庞秀英 李学荣 赵艳霞
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 干扰素 凋亡 增殖 分化 HL-60细胞系
• 年，卷（期）: 2007,（50）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 10217-10220
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 1952字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.50.036

摘要

背景:儿童急性白血病复发的主要根源是微小残留白血病细胞的存在,在试图清除微小残留病的众多治疗方法中,免疫生物治疗越来越受重视.以前的研究发现干扰素α-2b能有效抑制神经母细胞瘤和恶性淋巴瘤患儿体内肿瘤细胞的增长,其能否抑制白血病细胞的增长?目的:通过体外实验观察干扰素α-2b对白血病细胞的影响.设计:以人类早幼粒白血病细胞株HL-60为观察对象,对比观察实验.单位:青岛大学医学院附属医院儿科研究所细胞培养室、免疫实验室、细胞室.材料:HL-60细胞系由山东省医学科学院基础所提供.干扰素α-2b购自Megagene公司,FITC-兔抗鼠Ig工作液(CatEK001)和CD13抗人单克隆抗体工作液(Cat.DK013Y)购自协和干细胞基因工程有限公司.方法:体外建立HL-60细胞培养体系,调整细胞浓度为1×109 L-1,分为对照组和实验组,各实验组中加入终含量分别为5×105,1×106,2×106,5×106,1×107 U/L的干扰素α-2b,对照组加入等量生理盐水,继续培养48 h.光镜下采用瑞氏染色观察HL60细胞的形态变化,采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染色观察细胞凋亡,通过CD13蛋白表达测定观察细胞膜抗原表达及成熟分化,通过MTT实验检测HL-60细胞增殖活性.主要观察指标:根据HL-60细胞核染色质是否均匀一致及着色情况,判断细胞是否发生凋亡;根据酶标仪检测的吸光度(A值)判断HL-60细胞增殖情况;根据CD13阳性细胞数量判断HL-60细胞成熟程度.结果:①HL-60细胞凋亡:培养48 h,当干扰素α-2b为5×105 U/L时,以早期凋亡细胞为主,当干扰素α-2b含量为1×107 U/L时,以晚期凋亡细胞为主,HL-60细胞凋亡率均高于对照组,差异有显著性意义(χ2=23.79,29.57,P＜0.01).②HL-60细胞增殖情况:当干扰素α-2b含量为2×106 U/L和1×107 U/L时,A值均低于对照组,差异有显著性意义(t=5.65,11.31,P＜0.01).③HL-60细胞成熟程度:当干扰素α-2b含量为1×106 U/L和1×107 U/L时,CD13+细胞百分比均低于对照组,差异有显著性意义(χ2=26.89,14.73,P＜0.01).结论:干扰素α-2b有促进HL-60细胞凋亡、抑制HL-60细胞增殖和促进分化成熟的作用.