小鼠AFP/DC疫苗体外免疫活性检测及对小鼠皮下移植瘤抑制作用

• 作者: 卢放根 廖爱军 曾斌 石巍 阳学风
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲胎蛋白 肝细胞癌 疫苗 树突状细胞 小鼠 异种移植
• 年，卷（期）: 2007,（22）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2689-2694
• 页数: 6页
• 分类号: R73-36
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2007.22.001

摘要

目的 将已构建的Balb/c小鼠具有分泌性信号肽的AFP1cDNA和去掉信号肽的AFP2cDNA真核表达我体,分别在小鼠树突状细胞(DCs)中表达,并观察其在体外抗肝癌免疫中的作用和对小鼠皮下移植瘤的抑制作用.方法 脂质体转染PcDNA3.1(+)/AFP1、PcDNA3.1(+)/AFP2至DCs细胞进行表达、鉴定,将DCs疫苗与同源小鼠脾淋巴细胞混合培养,MTT比色法测定脾淋巴细胞的特异性杀伤肝癌细胞的活性.随后建立小鼠肝癌皮下移植瘤模型,用AFP1/DCs和AFP2/DCs进行皮下注射,观察其对Balb/c小鼠皮下移植瘤的抑制作用;观察各组治疗后皮下移植瘤的体积的大小,治疗组小鼠的存活期,取瘤组织行免疫组化观察Bax凋亡基因的表达情况,观察另一半荷瘤小鼠的生存时间.结果 所构建的真核表达质粒pcDNA3.1(+/-)/AFP1和pcD-NA3.1(+/-)/AFP2在小鼠树突状细胞中获得稳定高效表达,AFP2/DCs明显刺激T淋巴细胞的增殖及提高CTL的特异性杀伤作用,AFP1/DCs和AFP2/DCs皮下注射可显著抑制肝癌H22细胞移植瘤的生长,以AFP2/DCs的效果更明显,治疗2周后AFP2/DCs组小鼠的肿瘤体积(726.7±298.2)mm3明显小于AFP1/DCs组的肿瘤体积(1486.2±457.2)mm3和空质粒对照组的肿瘤体积(2137±547.2)mm3,两组间有统计学差异(P＜0.05),AFP2/DCs治疗组、AFP1/DCs治疗组的抑瘤率可达79.2%和39.7%,空质粒对照组和生理盐水对照组的抑瘤率为0;AFP2/DCs治疗组、AFP1/DCs治疗组的小鼠存活期分别为(54.5±4.2)d、(40.2±4.8)d,较空质粒对照组(30.6±6.2)d显著延长.AFP2/DCs治疗组移植瘤组织中Bax阳性细胞的百分率为92%.显著高于AFP1/DCs组(64%)和pcDNA/DCs(21%)和生理盐水组(23%),两组间差异有显著性(P＜0.05).结论 成功地构建了真核表达栽体PcDNA3.1(+)/AFP1和PcDNA3.1(+)/AFP2,编码去掉分泌性信号肽的AFP2cDNA真核表达载体转染的小鼠树突状细胞,能够诱导较强的特异性抗肝癌免疫效应.其机制可能与诱导肝癌细胞凋亡有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢放根	中南大学湘雅二医院消化内科	122	635	12.0	19.0
2	廖爱军	南华大学附属第一医院消化内科	71	326	9.0	14.0
3	阳学风	南华大学附属南华医院消化内科	97	421	11.0	15.0
4	曾斌	南华大学附属第一医院消化内科	64	241	7.0	12.0
5	石巍	南华大学附属第一医院消化内科	36	213	8.0	13.0