应用PCR-RFLP技术进行乙型流感病毒鉴别的实验研究

• 作者: 姚栩 张彩云 杨建娜 郑能雄 陈智伟
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型流感病毒 限制性片段长度多态性 聚合酶链反应 鉴别
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1948-1950
• 页数: 3页
• 分类号: R373.1+3
• 字数: 4025字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8685.2007.11.011

摘要

目的:应用聚合酶链反应(PCR)连接的限制性片段长度多态性(RELP)技术进行乙型流感病毒及其巴拿马株与维多利亚株两大谱系的鉴别.方法:根据GenBank中登录乙型流感病毒血凝素(HA)区域的核苷酸序列,应用软件进行序列比对,根据HA基因的保守区设计、筛选引物,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增流感病毒HA基因,用限制性内切酶HindⅢ酶切扩增产物并进行琼脂糖凝胶电泳,同时对检测方法进行特异性和灵敏性实验.结果:该方法对乙型流感病毒有特异性,与甲1和甲3型流感病毒无交叉反应.维多利亚株和巴拿马株HA基因均能被特异性引物所扩增,扩增产物经HindⅢ酶切后,乙型流感病毒巴拿马株在电泳谱上出现603 bp与242bp的两个可见片段,而维多利亚株因无HindⅢ酶切位点,仍呈872 bp的一个片段.该方法检测敏感度可达0.1 TCID50.结论:该方法是一种灵敏度高、特异性强的乙型流感病毒维多利亚株与巴拿马株鉴别的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚栩		29	101	5.0	7.0
2	张彩云		11	28	4.0	5.0
3	陈智伟		13	47	4.0	6.0
4	郑能雄		46	196	8.0	11.0
5	杨建娜		5	19	3.0	4.0