焦磷酸测序技术检测HBV基本核心启动子变异的研究

• 作者: 吴引伟 宋玉华 张亮 文剑 谈国蕾 赵磊
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 焦磷酸测序 肝炎病毒,乙型 基本核心启动子 变异
• 年，卷（期）: 2007,（26）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-16
• 页数: 3页
• 分类号: R575.1
• 字数: 3471字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2007.26.006

摘要

目的 建立HBV基本核心启动子(BCP)区变异的快速检测方法.方法 采用焦磷酸测序(pyrosequencing)技术,设计一对引物,其中一条经生物素标记,PER扩增产物含HBV BCP A1762T/G1764A双突变的区域,借用生物素包被葡聚珠纯化单链PCR产物,设计一条测序引物,运用焦磷酸测序技术对A1762T/G1764A两个变异点进行变异分析.通过对已知变异类型的HBV分离株进行测定分析,评价所建立方法的检测敏感性和特异性.结果 PCR扩增后,可在2 h内得到A1762T/G1764A两个变异点的突变情况.所建立方法的检测灵敏度达到HBV-DNA血清中的含量为103copies/ml;在所分析的HBV BCP区均可检测出变异株、非变异株及混合株,且所检测的结果与直接测序方法结果符合率为95%.结论 Pyrosequencing技术用于检测病毒基因突变有高通量、自动化程度高和结果准确等特点,适用于对HBV BCP区突变进行快速高通量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴引伟		28	109	5.0	9.0
2	张亮		46	341	6.0	18.0
3	谈国蕾		15	54	5.0	6.0
4	文剑		24	90	4.0	8.0
5	赵磊		30	153	5.0	11.0
6	宋玉华		12	27	3.0	4.0