H5N1亚型禽流感病毒HA基因核酸疫苗的构建及免疫效果研究

• 作者: 刘明 刘春国 孙恩成 李洪涛 杜金玲 杨涛 陈浩
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 HA基因 核酸疫苗 免疫效力
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 13-18
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 3597字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2008.07.003

摘要

采用RT-PCR技术扩增了高致病性禽流感病毒A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1) HA基因,然后将其克隆到真核表达载体pCI-neo中,获得重组质粒pCI-HA.在脂质体介导下转染Vero细胞,单抗免疫组化IPMA结果表明,HA蛋白在Vero E6细胞上大量表达. pCI-HA质粒在有或无脂质体佐剂存在下以50 μg剂量免疫接种Balb/c小鼠和SPF鸡,对照组只接种50 μg pCI-neo DNA,各组以相同剂量加强免疫两次,每次免疫间隔3周.每次免疫前采集血清用ELISA检测抗体效价.最后一次免疫后3周用106EID50的高致病性流感病毒A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)进行攻毒试验.免疫组小鼠抗体效价与对照组相比明显升高,但脂质体佐剂免疫组与非脂质体免疫组小鼠抗体效价差异不显著,基因免疫组小鼠能够抵抗H5N1高致病性禽流感病毒的致死性攻击.该核酸疫苗虽然能够诱导SPF鸡产生抗体应答,但抗体产生缓慢,效价较低.