含H5N1禽流感病毒核酸序列的病毒样颗粒的制备及应用

• 作者: 单军 史智扬 崔仑标 张文帅 戚宇华 李显 汪华 葛以跃
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: MS2噬菌体 禽流感病毒H5N1 病毒样颗粒 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 29-32,35
• 页数: 5页
• 分类号: R373.1
• 字数: 3601字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.01.008

摘要

目的 构建耐RNase酶的内含禽流感病毒H5N1亚型部分核酸序列的病毒样颗粒.方法 构建中间载体 pET32a-MS2,将禽流感病毒H5N1亚型的HA、NA和M基因片断连接到中间载体上,构建原核表达载体pET32a-MS2-HA,pET32a-MS2-NA和pET32a-MS2-M,分别转化宿主菌,诱导表达制备病毒样颗粒.结果 表达载体经PCR、酶切鉴定和测序分析后证实构建成功.电镜观察到了病毒样颗粒,荧光定量RT-PCR试验表明颗粒稳定性良好.结论 成功构建了含禽流感病毒H5N1部分核酸序列的病毒样颗粒且稳定性良好,可作为禽流感H5N1亚型RNA检测的标准品和质控品.