丙型肝炎病毒F蛋白克隆表达及其抗原性

• 作者: 侯刚 孔晓飞 张东华 张欣欣 金根娣 陆志檬 高得勇 龚启明
• 来源期刊: 中华传染病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒 病毒融合蛋白质类 克隆,分子 病毒核心蛋白质类 基因表达
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 4-8
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 4913字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-6680.2008.01.002

摘要

目的 在原核表达系统中诱导表达1b型HCV F蛋白及Core蛋白,建立F抗体ELISA检测方法,对F蛋白在慢性丙型肝炎患者体内的抗原性作相关研究.方法 应用RT-PCR方法从HCV感染者血清中获得Core蛋白编码基因,在第42位和144位人工增加或减少1个核苷酸,使其读码框移位,利用多重PCR技术拼接获得全长F蛋白的基因序列,分别构建编码F和Core蛋白的重组质粒.将鉴定正确的重组质粒转人大肠埃希菌BL21中,加入异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达HCV Core和F蛋白.应用镍离子亲和层析树脂纯化蛋白,并用Western印迹法鉴定其免疫原性.建立ELISA检测方法对121例慢性丙型肝炎患者血清巾抗F蛋白抗体进行检测.结果 成功构建含HCV F蛋白、Core蛋白编码基因的重组克隆,表达纯化获得的HCV F蛋白和Core蛋白,Western印迹法鉴定并确定其特异性.121例慢性丙型肝炎患者血清巾抗Core和抗F抗体的阳性率分别是93%和65%,而40例HBV感染者和40例健康对照者血清反应阴性.结论 F蛋白在HCV自然感染中有表达,并能产生特异的免疫反应,其生物学功能及在HCV感染过程中的作用有待进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张欣欣	上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科	80	285	11.0	14.0
2	张东华	上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科	15	53	3.0	7.0
3	龚启明	上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科	12	80	4.0	8.0
4	侯刚	上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科	3	1	1.0	1.0
5	孔晓飞	上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科	6	16	3.0	3.0
6	高得勇	上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科	6	16	2.0	3.0
7	金根娣	上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科	5	19	2.0	4.0