Cyr61蛋白表达载体的构建及表达

• 作者: 徐岩 梅长林 沈学飞
• 来源期刊: 中国中西医结合肾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分泌蛋白 急性肾衰竭 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 7-9
• 页数: 3页
• 分类号: R6
• 字数: 2766字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-587X.2008.01.003

摘要

目的:体外表达并纯化Cyr61蛋白片段.方法:提取乳腺癌组织总RNA,用一步法RT-PCR选择扩增编码Cyr61蛋白的cDNA片段,并将之克隆到融合蛋白表达载体pQESOL中,转染大肠杆菌Rosetta-gamiTM2.异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,用亲和层析法纯化.纯化产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质印迹分析鉴定.结果:克隆到编码Cyr61蛋白片段的cDNA片段,其大小为930 bp.构建的表达质粒pQE80-Cyr61经限制性内切酶酶切和DNA测序证实为所需要的质粒.表达出相对分子质量分别为32 kD的可溶性融合蛋白,经蛋白质印迹分析鉴定为Cyr61的融合蛋白.结论:本实验克隆了编码Cyr61蛋白片段的eDNA序列,并成功地获得了可溶性表达的融合目的蛋白,为进一步制备抗Cyr61蛋白的抗体和建立Cyr61蛋白定量检测方法创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐岩	青岛大学医学院附属医院肾内科	121	534	11.0	18.0
2	沈学飞		5	47	4.0	5.0