抑癌基因RUNX3在膀胱癌T24细胞株中的表达以及对凋亡的影响

• 作者: 周琦 周祥福 温机智 温机灵 王林
• 来源期刊: 中华腔镜泌尿外科杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: 膀胱肿瘤 抑癌基因 T24细胞 甲基化
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 51-55
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4518字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-3253.2008.04.017

摘要

目的 明确RUNX3抑癌基因在正常膀胱组织和膀胱癌T24细胞株的甲基化状态,并将野生型RUNX3基因转染T24细胞,探讨RUNX3基因恢复表达后对膀胱癌细胞凋亡的影响. 方法应用RT-PCR、甲基化特异性PCR和非甲基化PCR检测正常膀胱组织、膀胱癌T24细胞中RUNX3基因的表达以及基因启动子区域CpG岛的甲基化状态.构建真核载体的RUNX3-EGFP-pDest质粒,在LipefectamineTM2000介导下转染膀胱癌T24细胞,转染实验设立3组:空白对照组、空质粒EGFP-pDest转染组以及RUNX3-EGFP-pDest转染组.Western blot检测RUNX3蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡情况. 结果正常膀胱组织RT-PCR可检测出1248bp的RUNX3基因条带,而膀胱癌T24细胞中无法检测出RUNX3基因的表达.正常膀胱组织RUNX3基因甲基化PCR检测阴性,非甲基化PCR阳性;T24细胞反之.正常膀胱粘膜组和RUNX3-EGFP-pDest质粒转染组Western blot检测,均表达RUNX3蛋白,而膀胱癌T24细胞未表达RUNX3蛋白.流式细胞仪检测,空白对照组的凋亡率为(3.1±0.46)%,而EGFP-pDest转染组和RUNX3-EGFP-pDest质粒转染组的凋亡率分别为(10.1±1.62)%、(41.20±1.53)%,应用方差分析的LSD法和SNK法进行均数的多重两两比较,RUNX3-EGFP-pDest质粒转染组与EGFP-pDest转染组、空白对照组凋亡率之间的差异均具有显著性,P<0.01.结论 正常膀胱组织RUNX3基因正常表达,未发生启动子区域CpG岛甲基化,而膀胱癌T24细胞可能因RUNX3基因启动子区域CpG岛发生甲基化,致RUNX3基因无法表达.转染野生型RUNX3抑癌基因后促进了膀胱癌T24细胞的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周祥福	广州市天河路600号中山大学附属第三医院泌尿外科	11	106	7.0	10.0
2	温机灵	上海市即墨路150号同济大学附属东方医院泌尿外科	1	5	1.0	1.0
3	温机智	广州市天河路600号中山大学附属第三医院中心实验室	1	5	1.0	1.0
4	周琦	广州市天河路600号中山大学附属第三医院泌尿外科	1	5	1.0	1.0
5	王林	广州市天河路600号中山大学附属第三医院泌尿外科	1	5	1.0	1.0