siRNA对HEK293细胞WT1表达的抑制作用及对K562细胞增生的影响

• 作者: 张丽 朱镭 李晓红 王宏伟 田彩霞 白波
• 来源期刊: 白血病·淋巴瘤
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 RNA,小分子干扰 基因,肾母细胞
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 408-411
• 页数: 4页
• 分类号: R730.3
• 字数: 3463字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9921.2008.06.003

摘要

目的 探讨以WT1基因为靶标治疗白血病的可行性,筛选有效抑制WT1基因表达的siRNA并观察其对K562细胞增生的影响.方法 制备特异性WT1 siRNA3条,转染HEK293细胞株,采用荧光定量RT-PCR方法 检测WT1基因mRNA表达,Western blotting法检测WT1蛋白表达;MTY法检测细胞增生的影响.结果不同位点的siRNA对WT1基因抑制作用不同.si-wt1-1对WT1mRNA抑制明显(P＜0.05),si-wt1-2、si-wt1-3对WT1mRNA无抑制(P＞0.05).100 nmol/L si-wt1-1能使WT1mRNA的表达在转染后24h和48 h分别降低至对照组的(42.5±1.0)%(P＜0.05)、(25.3±1.5)%(P＜0.01),但72 h恢复至对照组水平.siRNA作用无明显剂量依赖性,不同浓度si-wt1-1对WT1mRNA抑制作用的比较差异无统计学意义(P＞0.05).Western blotting法榆测证实转染siRNA 48、72、96 h后,si-wt1-1对WT1蛋白抑制明显(P＜0.05),且96 h抑制作用最强;si-wt1-2、si-wt1-3无明显抑制作用(P＞0.05).si-wt1-1对K562细胞增生有抑制作用,si-wt1-1处理组与阴性对照组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 siRNA可有效抑制HEK293细胞WT1基因的表达,且mRNA水平抑制效果优于蛋白水平.si-wt1-1可有效抑制K562细胞的增生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宏伟	山西医科大学第二医院血液病研究所	81	238	7.0	11.0
2	朱镭	山西医科大学第二医院血液病研究所	75	285	9.0	14.0
3	张丽	山西医科大学第二医院血液病研究所	108	381	8.0	14.0
4	白波	山西医科大学第二医院血液病研究所	33	143	8.0	10.0
5	李晓红	山西医科大学第二医院血液病研究所	6	14	2.0	3.0
6	田彩霞	山西医科大学第二医院血液病研究所	1	1	1.0	1.0