昆明鼠乙酰胆碱酯酶基因克隆与表达

• 作者: 刘德立 张华 张建华 张立媛 李娜 杨俊忠 杨雪婷 袁永泽
• 来源期刊: 华中师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 乙酰胆碱酯酶 RT-PCR cDNA克隆 表达
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 597-601
• 页数: 5页
• 分类号: Q812
• 字数: 2997字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1190.2008.04.022

摘要

乙酰胆碱酯酶(AChE)作为有机磷和氨基甲酸酯类农药的最适反应底物,在农药残留的快速检测中得到广泛应用,本实验根据家鼠AChE全基因序列设计并合成一对特异性引物,对昆明鼠脑组织AchE进行RT-PCR扩增,扩增产物经T-载体克隆、酶切鉴定和测序分析,结果表明:昆明鼠AchE编码序列长1 845 bp.经BLAST比对发现该序列与已报道序列(No.BC046327)的同源性为99.78%.构建原核重组表达质粒pET-AChE,并在E.coli中得到高效表达,表达蛋白的分子量约为68 000.运用改进的Ellman法成功检测到时重组表达蛋白的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李娜	华中师范大学生命科学学院	76	279	11.0	13.0
2	刘德立	华中师范大学生命科学学院	74	1006	18.0	29.0
6	杨雪婷	华中师范大学生命科学学院	4	21	3.0	4.0
7	张华	华中师范大学生命科学学院	14	43	4.0	6.0
8	张立媛	华中师范大学生命科学学院	2	18	2.0	2.0
9	张建华	华中师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0
10	杨俊忠	华中师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0
11	袁永泽	华中师范大学生命科学学院	7	15	3.0	3.0