大肠埃希菌表达的含PTD穿膜序列的融合蛋白3种复性方法比较

• 作者: 夏圣 宗扬勇 彭鑫 王胜军 申卫红 茹松伟 许化溪 邵启祥
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白转导域 复性 包涵体
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 检验医学
• 页码范围: 251-254
• 页数: 4页
• 分类号: TQ93|R392.12
• 字数: 3599字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2008.03.017

摘要

目的: 探索融合蛋白PTD-NFATminiDBD-eGFP纯化以及复性的条件,以提高其复性效率,为后续融合蛋白生物学功能的研究做准备.方法: 表达、提取并纯化包涵体形式的融合蛋白PTD-NFATminiDBD-eGFP,分别用稀释复性、透析复性、柱上复性的方法,对融合蛋白进行复性,分析不同方法的特点及包涵体复性率,采用流式细胞术检测融合蛋白的穿膜活性.结果: 3种复性方法得到的融合蛋白复性率依次为:柱上复性得率最高,其次是透析复性,稀释复性得率最低.柱上复性后蛋白的穿膜效率最高,相对较低的是稀释复性,而未复性的融合蛋白穿膜效率极低.结论: 3种复性方法均能对PTD穿膜蛋白复性,但以柱上复性最佳.