家蚕抗菌肽CM4和人可溶性BAFF融合基因的克隆、表达及活性鉴定

• 作者: 刘平 刘海峰 张双全 李楠楠
• 来源期刊: 南京师大学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 抗菌肽CM4 人的可溶性BAFF 抗菌活性 融合基因 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 87-91
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3433字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4616.2008.02.018

摘要

采用PCR法从含有人可溶性BAFF基因的pET30a(+)扩增得到人sBAFF基因,通过rPCR将抗菌肽Cecropin CM4基因的2条单核苷酸链进行扩增得到CM4基因,再采用over-lap PCR法通过linker将hsBAFF与Cecropin CM4融合基因相连接.经纯化和鉴定后,定向插入到原核表达载体pET30a(+)中,然后转化E.coliBL21(DE3),通过实验确定了表达该融合基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为1.0 mmol/L,诱导时间为5 h.温度为30℃,其表达量占全菌蛋白的40%.表达产物经SDS-PAGE分析,得到相对分子质量约为22 000的重组蛋白并且存在超声裂解后的上清中.重组蛋白经Western blot检测,结果显示重组蛋白可被鼠抗人可溶性BAFF的抗体识别.采用分子筛Sephadex G-75对重组融合蛋白进行纯化,并经SDS-PAGE对其鉴定.通过对其生物学功能的检测得知,纯化后的重组融合蛋白对大肠杆菌K12D31和真菌有明显的抑菌能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张双全	江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院	5	26	4.0	5.0
2	刘海峰	江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院	2	26	2.0	2.0
3	刘平	江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院	1	8	1.0	1.0
4	李楠楠	江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院	1	8	1.0	1.0