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摘要:
目的 观察可诱导共刺激因子(inducible co-stimulator factor,ICOS)短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对大鼠活化T细胞中ICOS基因的沉默效应,筛选有效干扰靶点.方法 设计合成ICOS RNA寡核苷酸片段,经退火、连接等步骤克隆至线性化的pRNAT-U6.1/Neo真核表达载体上,测序鉴定.应用Lipofectamine 2000将该质粒转染活化的大鼠T细胞,荧光定量RT-PCR检测ICOS mRNA表达情况,Western blot检测ICOS蛋白表达情况.结果 成功构建了3个靶点的重组质粒pRNAT-U6.1/Neo-ICOS-siRNA 1、2、3,荧光定量RT-PCR和Western blot显示转染这3种重组质粒的T细胞ICOS mRNA和蛋白表达均较对照组有不同程度的下降,其中1号靶点的干扰效应最为明显.在转染后的T细胞中,其抑制率分别达到了51.3%、78.3%.结论 重组质粒pRNAT-U6.1/Neo-ICOS-siRNA能有效抑制大鼠活化T细胞中ICOS基因的表达,并筛选出了有效干扰靶位.RNA干扰技术有望成为研究ICOS在实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎中作用的有效手段.
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文献信息
篇名 RNA干扰体外抑制大鼠ICOS基因的表达
来源期刊 眼科新进展 学科 医学
关键词 可诱导共刺激因子 RNA干扰 实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎 转染
年,卷(期) 2008,(3) 所属期刊栏目 实验研究
研究方向 页码范围 186-189
页数 4页 分类号 R774|R394.8
字数 3773字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1003-5141.2008.03.007
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 崔浩 94 383 11.0 17.0
2 吕冰洁 10 44 5.0 6.0
3 傅少颖 33 80 5.0 7.0
4 侯勇生 12 21 2.0 4.0
5 邢琳 6 1 1.0 1.0
6 刘洪玲 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
可诱导共刺激因子
RNA干扰
实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎
转染
研究起点
研究来源
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引文网络交叉学科
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眼科新进展
月刊
1003-5141
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河南省新乡市新乡医学院
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1980
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