应用RNA干扰技术体外抑制脂蛋白脂肪酶基因的表达

• 作者: 冼勋德 刘国庆 刘明 范江霖 赵铁强 高松 黄薇
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病理学与病理生理学 脂蛋白脂肪酶基因的RNA干扰 RNA干扰 脂蛋白脂肪酶 短发夹RNA 基因表达 动脉粥样硬化
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 45-47
• 页数: 3页
• 分类号: R363
• 字数: 2434字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2005.01.012

摘要

目的给探讨脂蛋白脂肪酶基因作为动脉粥样硬化基因治疗靶点提供实验基础.方法利用RNA干扰技术在细胞水平抑制脂蛋白脂肪酶基因的表达,根据人脂蛋白脂肪酶基因设计靶序列短发夹RNA,构建重组干扰质粒pSIREN-DNR-shRNA,将干扰质粒与人脂蛋白脂肪酶真核表达质粒pCDNA3-hLPL以脂质体方法共转染COS-7细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应、Western blot和活性检测等方法判断脂蛋白脂肪酶基因抑制的效果.结果转染干扰质粒的细胞中脂蛋白脂肪酶mRNA、蛋白表达以及酶活性均明显降低,抑制率可达70%以上.结论所选靶序列可以有效抑制细胞中脂蛋白脂肪酶基因的表达,为进一步的体内研究奠定了基础.