Rotor-Gene链融解曲线法甲基化标记筛选技术的建立

• 作者: 刘良 杨渝珍 莫耀南 赵贵森 郑海燕
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA甲基化 链融解曲线法 亚硫酸氢盐 雄激素受体
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 116-119
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2987字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2008.01.040

摘要

目的:建立基于Rotor-Gene的链融解曲线法的甲基化标记筛选技术,分析各种影响因素,评估其实用性.方法:克隆Hela细胞雄激素受体基因外显子-1的Bisulfite-PCR产物,挑出经测序证实的可以代表不同甲基化程度的一组质粒,并以之为模板,在Rotor-Gene 3 000实时定量PCR仪进行扩增和链融解,分析融链温度、链融解曲线与甲基化程度、甲基化模式的相关性及各种影响因素.结果:基于Rotor-Gene 的链融解曲线法,不仅可以区分甲基化与非甲基化,而且能够鉴别片段内细微的甲基化差异;主要的影响因素有升温幅度、缓冲液离子强度、产物浓度等.结论:基于Rotor-Gene 的链融解曲线法,可以集扩增和链融解于一体,是一种经济简便的甲基化分析技术,可用于样品的甲基化筛选.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	莫耀南	华中科技大学同济医学院法医学系	121	282	8.0	10.0
3	刘良	华中科技大学同济医学院法医学系	197	1205	15.0	25.0
4	杨渝珍	华中科技大学同济医学院法医学系	36	111	5.0	9.0
5	郑海燕	河南科技大学法医学院	9	24	3.0	4.0
6	赵贵森	河南科技大学法医学院	16	35	3.0	5.0