口蹄疫病毒3ABC基因截短体在毕赤酵母中的表达及鉴定

• 作者: 屈勇刚 李昌 沈国顺 郑敏 金宁一 陈晓月 霍晓伟 马海利 马鸣潇 鲁会军
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒(FMDV) 3ABC基因 毕赤酵母 分泌表达 诊断抗原
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 104-108
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|O629|S85.165
• 字数: 3238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0251-0790.2008.01.020

摘要

将长为525 bp的口蹄疫病毒3ABC基因截短体克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建了重组表达质粒pPIC9K-3ABCt.用BglⅡ线性化后,电转化毕赤酵母菌GS115,经表型筛选,PCR鉴定,获得阳性重组菌(GS115/pPIC9K-3ABCt).然后进行诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物.结果表明,重组菌株成功分泌表达了分子量为40000,具有免疫反应活性,且呈二聚体形式的目的蛋白.在96 h时表达量达到最高峰,占分泌总蛋白的18%,达到234 mg/L.为进一步研制口蹄疫免疫和感染动物鉴别诊断试剂奠定了基础.