重组人CD40 L功能性片段在CHO细胞中的表达

• 作者: 吴梧桐 曹开源 蒋玉辉 陈华
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: CD40配体 CHO细胞 表达 生物活性
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 115-117
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 1707字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2008.02.008

摘要

克隆人CD40 L基因功能性片段(E107-L261),并在CHO细胞中进行表达.从健康人扁桃体组织中提取总RNA,通过RT-PCR技术,扩增CD40 L胞外区cDNA功能性片段,经DNA测序证实后,将得到的片段基因插入pcDNA3.0表达载体,构建了pcDNA3.0-hCD40 L真核表达载体.将重组质粒pcDNA3.0-hCD40 L转染CHO细胞,经G418筛选出阳性细胞克隆,扩大培养,提取细胞总蛋白,用SDS-PAGE分离并western blot-ting鉴定其特异性,通过小鼠脾淋巴细胞增值实验检验其生物学活性.结果,CD40 L胞外区功能性片段(E107-L261)cDNA被正确克隆到真核表达载体pcDNA3.0中并在CHO中成功表达,具有免疫学和生物学活性.结论:真核表达载体peDNA3.0-CD40 L的成功构建并在CH0中成功表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴梧桐	中国药科大学生命科学与技术学院	256	2771	24.0	37.0
2	曹开源	中山大学免疫学教研室	61	218	8.0	10.0
3	陈华	中国药科大学生命科学与技术学院	13	29	3.0	5.0
5	蒋玉辉		10	10	2.0	2.0