基因工程菌Pseudomonas sp.B4的构建及其产邻苯二酚发酵条件的初步研究

• 作者: 唐咸来 梁璇 武波 熊建文 申佩弘
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 假单胞菌 苯甲酸钠 苯甲酸双加氧酶基因簇 邻苯二酚
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 79-83
• 页数: 5页
• 分类号: Q819
• 字数: 3714字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2008.10.016

摘要

利用PCR技术以Pseudomonas sp. B3-1基因组DNA为模板,扩增出2.9kb编码苯甲酸双加氧酶基因簇benABC.将该基因簇连接于pLAFRJ载体,电转化至E.coli DH5α,再通过三亲本结合法导入野生菌株Pseudomonas sp. B3-1中,得到了一株邻苯二酚产量提高的基因工程菌,命名为Pseudomonas sp.B4,在相同发酵条件下,工程菌Pseudomonas sp.B4的邻苯二酚产量达到0.5mg/ml,比野生菌株Pseudomonas sp. B3-1提高了17.5%.对工程菌Pseudomonas sp.B4进行发酵条件优化表明,当苯甲酸钠浓度为6.0 g/L,聚蛋白胨浓度为2.5 g/L,温度为32℃以及pH值为6.0时,工程菌在200r/min旋转摇床发酵36小时后,邻苯二酚产量达到0.7 mg/ml,比野生菌株Pseudomonas sp. B3-1提高了75%.