抗猪鼻支原体单克隆抗体的研制及双抗体夹心ELISA检测法的建立

• 作者: 刘星 张丽芳 李红 杨玉萍
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 猪鼻支原体 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 55-58
• 页数: 4页
• 分类号: R-33
• 字数: 3188字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2008.03.013

摘要

目的 制备多种抗猪鼻支原体的单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA方法用于该病原体的检测.方法 用猪鼻支原体CVCC361免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术和酶联免疫吸附实验筛选出抗该病原体的单克隆抗体;运用免疫双向扩散试验、Westem blotting确定IgG亚类及针对抗原的相对分子质量;筛选出配对抗体,建立双抗体夹心ELISA的检测方法,并评价其灵敏度和特异性.结果 共筛选出17株单克隆抗体,抗体亚类分别为ISG1、IsG2、 IgG2b、IgG3,免疫印迹结果表明单抗ZBI、ZB2及ZB16与相对分子质量为35×103的抗原有特异性结合,而ZB3和ZBl0与相对分子质量为70 × 103的抗原有特异性结合.确定了2个配对抗体(ZBI-ZBI-HRP和ZB1-ZB2-HRP),可检出最小抗原量为30ng/mL,检出猪鼻支原体活菌8.34×102CFU/mL,与人呼吸道常见的致病菌及支原体均无非特异性反应.结论 筛选的单克隆抗体具有较高的特异性和敏感性,应用双抗体夹心ELISA方法可用于猪鼻支原体的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘星	中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所	23	113	6.0	9.0
2	李红	中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所	23	130	7.0	9.0
3	张丽芳	中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所	23	120	7.0	9.0
4	杨玉萍	中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所	6	118	3.0	6.0