沉默BRCAA1基因对胃癌MGC-803细胞的抑制作用及其可能的机制

• 作者: 刘彬 宋华 崔大祥 李智铭 杜彤 杨浩 甘慧 鲍晨晨
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺癌相关抗原基因1 shRNA 胃癌细胞 增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 522-526
• 页数: 5页
• 分类号: R735.2|R730.54
• 字数: 3544字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2008.06.004

摘要

目的:研究沉默乳腺癌相关抗原1(breast cancer-associated antigen 1,BRCAA1)基因对胃癌细胞株MGC-803的抑制作用及其可能的机制.方法:构建BRCAA1基因shRNA载体,将构建的shRNA-BRCAA1质粒与阴性对照质粒shRNA-N转染胃癌MGC-803细胞,24 h后用荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR检测BRCAA1和GAPDH基因mRNA表达水平.MTT法检测转染后24、48与72 h的细胞增殖水平,Annxin-V PE/7AAD检测转染24 h后的细胞凋亡水平,Western blotting检测转染48 h后细胞的凋亡相关蛋白表达水平.结果:BRCAA1 siRNA表达质粒转染MGC-803细胞24 h 的转染效率为(81.2±2.6)% .转染后48 h MGC-803细胞的BRCAA1 mRNA水平下降了61.4%,MGC-803细胞增殖的抑制率达45.0%,转染siRNA细胞的凋亡率明显高于未转染细胞和对照质粒转染细胞[(14.4±1.6)% vs(5.4±2.0)%,(4.4±2.5)%,P<0.05].转染siRNA细胞的凋亡相关蛋白Rb与Bax的表达量显著增加(P<0.05),Bcl-2的表达量显著减少(P<0.05).结论:BRCAA1基因的沉默可有效抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖和诱导细胞凋亡,其机制与其促进Rb和Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达有关.