含额外拷贝ERG3B基因烟曲霉的表型分析

• 作者: 万喆 乔建军 刘伟 李若瑜
• 来源期刊: 中国皮肤性病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 烟曲霉 ERG3B基因 额外拷贝 抗真菌药物敏感性 菌丝生长
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 19-22
• 页数: 4页
• 分类号: R392.13|R379
• 字数: 3306字
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆烟曲霉ERG3B基因,并构建烟曲霉ERG3B基因额外拷贝株,了解该基因对烟曲霉表型的影响.方法 通过同源性比对,在烟曲霉基因组找出烟由霉可能的ERG3基因的开放读码框(ORF),PCR扩增ERG3B基因ORF连同其上下游各约1 kb的DNA片段,将该片段重组到穿梭质粒pRG-AMA1-Not1.用重组后的质粒转化嘧啶营养缺陷株烟曲霉AF293.1.观察转化子的生长速度并测定转化子对抗真菌药物敏感性.结果 ①烟曲霉ERG3基因有3个拷贝(ERG3A,ERG3B,ERG3C).Erg3Ap和Erg3Bp与其他真菌的Erg3同源性高.②烟曲霉ERG3B基因被重组到了pRG-AMA1-Not1,产生质粒pERG3B.用pERG3B和空载体pRG-AMA1-Not Ⅰ转化AF293.1后,分别得到转化子AF-pERG3B和AF-empty.AF-pERG3B与AF-empty的生长速度无差异;两者对伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性也无差异.结论 额外拷贝的ERG3B基因不影响烟曲霉的生长速度及对伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性.