人血管内皮细胞生长抑制因子基因转移抑制角膜新生血管的实验研究

• 作者: 庞琦 王传富 王冰 王利华
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 角膜新生血管化 肿瘤坏死因子α 脂质体 基因疗法
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 929-933
• 页数: 5页
• 分类号: R77
• 字数: 4139字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0412-4081.2008.10.014

摘要

目的 探讨以阳离子脂质体介导重组人pcDNA4-血管内皮细胞生长抑制因子(VEGI)基因转移对角膜新生血管的抑制作用.方法 实验研究.40只健康成年新西兰大白兔(40只眼),采用随机数字表法分为4组:A组(10只兔)为阳离子脂质体-重组人pcDNA4-VEGI基因转染组;B组(10只兔)为空白载体转染组;C组(10只兔)为阳离子脂质体转染组;D组(10只兔)为空白对照组.自行构建真核表达的重组人血管内皮细胞生长抑制因子(VEGI)基因,并检测重组基因的正确性;角膜缝线法制作兔角膜新生血管模型,用结膜下注射的方法将阳离子脂质体包裹的VEGI重组质粒(pcDNA4-VEGI)转染入兔角膜,裂隙灯显微镜下观察记录各组兔角膜新生血管长出的时间、角膜新生血管的长度和数量,并分别于基因转染后1、3、7、14及21 d以免疫组织化学方法观察VEGI基因表达情况,观察其对角膜新生血管的抑制作用.采用SPSS 10.0单因素方差分析行数据统计.结果 计算机自动测序证实成功构建真核表达的重组人VEGI基因;动物实验中基因转染组角膜新生血管平均出现时间为6.3 d,对照组分别为3.1、3.2、3.2 d不等,差异有统计学意义(F=39.838,P=0.00);基因转染后第3天,转染组实验兔未出现角膜新生血管,对照组已有部分兔眼出现角膜新生血管;转染后第7天,转染组实验兔的角膜新生血管纤细,累及钟点数局限于缝线周围,对照组兔的角膜新生血管最长为2.9 mm,血管密集;转染后第14天,转染组兔角膜新生血管最长达4.0 mm,对照组新生血管最长达6.4 mm,累及钟点数为3.2个;各时间段基因转染组角膜新生血管长度、平均面积与对照组相比,差异均有统计学意义.A组角膜新生血管长度与B组相比,第7、14、21天q值分别为17.386、20.944、8.892,P值均＜0.01;与C组相比,第7、14、21天q值分别为19.488、19.795、7.483,P值均＜0.01;与D组相比,第7、14、21天q值分别为19.583、20.413、8.941,P值均＜0.01.A组角膜新生血管面积与B组相比,第7、14、21天q值分别为30.238、57.820、35.543,P值均＜0.01;与C组相比,第7、14、21天q值分别为32.607、57.843、36.653,P值均＜0.01;与D组相比,第7、14、21天q值分别为33.873、57.590、34.724,P值均＜0.01.免疫组织化学显示角膜上皮、基质、新生血管管壁细胞的VEGI表达阳性.结论 利用人工合成引物和聚合酶链反应方法可以将连接于原核表达载体的VEGI基因切下并连接于真核表达载体;阳离子脂质体能够介导重组人VEGI基因转染入角膜组织并使其分泌VEGI蛋白,对角膜新生血管有抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王传富	青岛大学医学院附属医院眼科	70	328	11.0	14.0
2	庞琦	山东大学附属省立医院神经外科	88	355	11.0	14.0
3	王利华	山东大学附属省立医院眼科中心	48	238	10.0	11.0
4	王冰	山东大学附属省立医院眼科中心	31	96	5.0	8.0