M蛋白基因shRNA抑制PRRSV在Marc145细胞中复制的研究

• 作者: 姜平 李玉峰 蒋文明 黄娟
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: PRRSV RNA 干扰 M蛋白基因
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 兽医·资源昆虫
• 页码范围: 259-264
• 页数: 6页
• 分类号: S8
• 字数: 4074字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.01.035

摘要

[目的]通过靶向PRRSV基因组中的M基因的siRNA来抑制PRRSV在Marc145细胞中的复制.[方法]构建4个能转录小发夹RNA(shRNA)的质粒,将其与靶蛋白表达质粒共转染HEK293A细胞,观察荧光或进行半定量PCR;或将其转染Marc145细胞,感染PRRSV后进行IFA、TCID50和实时PCR检测.[结果] shRNA表达质粒对M融合蛋白表达的抑制率约为50%,使M真核质粒表达蛋白的mRNA水平降低54%～64%,表达的shRNA在PRRSV感染后48 h使病毒的TCID50和mRNA水平均降低到1/10～1/100倍,间接免疫荧光结果表明shRNA表达质粒转染孔的荧光细胞数显著减少.[结论]shRNA表达质粒特异性的抑制了靶蛋白M和PRRSV的复制,靶向PRRSV基因组M基因不同区域的siRNA可以作为控制该病毒传播的候选策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄娟		32	77	6.0	7.0