小鼠破骨细胞诱导及成纤维生长因子受体表达检测

• 作者: 李福兵 段亚琪 苏楠 赵玲 陈林 陈锚锚 鲁秀敏
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 破骨细胞 成纤维生长因子受体 RT-PCR Western blot
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1046-1048
• 页数: 3页
• 分类号: Q813
• 字数: 2404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6273.2008.06.013

摘要

目的:检测成纤维生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)在小鼠破骨细胞中的表达情况,为探讨FGFRs时破骨细胞的直接调控作用奠定基础.方法:采用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)和破骨细胞分化因子(receptor activator of nuclear factor-B ligand,RANKL)诱导小鼠骨髓单核细胞分化为破骨细胞.提取细胞总RNA后经逆转录获得小鼠破骨细胞cDNA,根据FGFRs基因编码区序列设计的引物进行PCR扩增并对PCR扩增产物进行测序.为进一步验证转录水平的结果,提取细胞总蛋白电泳后进行免疫印迹实验.结果:诱导5d后可见TRAP(+)多核细胞出现,小鼠破骨细胞在转录水平和翻译水平均只可检测到FGFR1和FGFR3基因的表达产物.结论:M=CSF和RANKL可成功诱导出小鼠破骨细胞,FGFR1和FGFR3基因在小鼠破骨细胞中均有表达.