H5N1亚型禽流感病毒核蛋白NP的原核表达及抗体制备

• 作者: 潘兹书 罗孟成 肖庚富 陶攀
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: H5N1 A型流感病毒 核蛋白NP 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 202-204,209
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 2692字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.03.004

摘要

目的 制备H5N1亚型禽流感病毒NP重组蛋白和抗体,为研制含NP组分的人禽流感亚单位疫苗和建立评价方法提供检测抗原和抗体.方法 以H5N1亚型禽流感病毒A/chicken/Hubei/489/2004(H5N1)NP基因cDNA克隆质粒pMD-NP为模板, PCR扩增获得NP基因抗原区片段,克隆到原核表达载体pET-28a,构建重组质粒pET-ΔNP,转化大肠杆菌BL21-CondonPlus (DE3)-RIL,IPTG诱导重组蛋白表达.采用Ni亲和层析方法纯化NP重组蛋白,免疫家兔,收集免疫血清,ELISA测定抗体效价;间接免疫荧光检测所制备抗体与真核细胞表达NP蛋白的反应性.结果 与结论成功的制备了高效价兔抗NP抗体,抗体效价在105以上,该抗体能与原核和真核系统中表达的NP蛋白特异性反应,为研制以NP蛋白为抗原组分的人禽流感亚单位疫苗和建立评价方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘兹书	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	19	235	8.0	15.0
2	陶攀	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	2	11	2.0	2.0
3	肖庚富	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	15	159	7.0	12.0
4	罗孟成	武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室	1	7	1.0	1.0