RNAi介导Caspase-3基因及其抑制LPS诱导肾脏上皮细胞凋亡的研究

• 作者: 刘健 刘晓晴 张艳 贡福盛 陈栋
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 Caspase-3 基因沉默 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 16-19
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 字数: 4160字
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨RNA干扰Caspase-3基因及抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的作用效果.方法:构建针对大鼠Caspase-3基因编码区的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体质粒pRNAT-U6.1-caspase-3 shRNA,用电穿孔法转染RK3E细胞,经G418筛选后,形成稳定的表达Caspase-3 shRNA 的细胞系.实验分为3组:①正常对照组:未转染的RK3E细胞;②阴性对照组:转染空载体pRNAT-U6.1的RK3E细胞系;③实验组:转染Caspase-3 shRNA的RK3E细胞系.经脂多糖(LPS)孵育12小时后,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,RT-PCR检测mRNA的表达,以及各组Caspase-8蛋白的活性.结果:与正常对照组和阴性对照组相比,实验组的细胞凋亡率显著降低(P<0.01),Caspase-3的mRNA水平和蛋白活性显著降低(P<0.01).结论:针对Caspase-3的特异性短发夹RNA可以明显引起靶基因的沉默,进而抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的发生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张艳	华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科	145	988	17.0	24.0
2	刘晓晴	华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科	53	411	11.0	18.0
3	刘健	华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科	31	158	8.0	11.0
4	贡福盛	华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科	2	17	2.0	2.0