牛病毒性腹泻-黏膜病病毒双抗体夹心Dot-ELISA检测方法的建立

• 作者: 张宁 李兰芳 秦建华 赵博伟
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒 斑点酶联免疫吸附试验 检测
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 检验检疫
• 页码范围: 72-74
• 页数: 3页
• 分类号: S851.34
• 字数: 2439字
• 语种: 中文

摘要

采用辛酸-硫酸铵法提取兔抗牛病毒性腹泻-黏膜病毒(BVDV)高免血清中的免疫球蛋白IgG,辣根过氧化物酶标记提纯后IgG,建立了检测BVDV抗原的双抗体夹心斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)法.结果显示,抗体最佳包被量为300μg/mL,酶标记抗体的最适浓度为1:50倍稀释,以5%牛血清作为封闭液、封闭45 min效果最佳.抗原最小检出量是1.34μg/mL.应用建立的检测方法对河北省内78份腹泻奶牛血样进行了检测,阳性检出率为57.69%;经卡方检验分析,建立的Dot-ELIsA与琼脂扩散(AGP)法相比较,阳性检出率差异显著.试验证明,该方法具有简便快速、特异性强、重复性高的优点,适合于基层兽医的检测诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦建华		172	899	15.0	20.0
2	张宁		39	189	7.0	13.0
3	赵博伟		26	72	5.0	8.0
4	李兰芳		4	3	1.0	1.0